【据《
Hepatology
》
2010年
1月报道】题:
HepaRG
细胞的先天免疫反应控制
HBV病毒复制(作者
Lucifora J
等)
HBV
目前被认为是不引发体内先天免疫的“鬼鬼祟祟”(
stealth)病毒。由于缺乏相关的细胞培养系统,这种看法以前也无法用体外实验证实或反驳。而
HepaRG细胞在这方面却开辟了新天地,
HepaRG细胞是具有双向分化潜能的肝脏细胞,可分化为胆管细胞和肝细胞,在生理上与分化的肝细胞相近,可以感染上
HBV病毒。携带有
HBV全基因组的重组杆状病毒可有效转导肝细胞,并可启动时间可控的、高速的
HBV体外复制。为了监测
HBV复制,作者分别用
Southern blot和
ELISA检测病毒核酸壳
DNA的合成和
HBsAg的分泌。
I型
IFN反应的诱导用靶向定量
RT-PCR (qRT-PCR)、低密度芯片和功能分析等监测
,用抗体中和或
RNA干扰以终止
I型
IFN反应。结果发现在
HepaRG细胞,
HBV引发强烈而特异的先天性抗病毒反应,清除
HBV DNA而不引起细胞破坏。如用
Bac-HBV-WT 转导,不用可控的重组杆状病毒,会引起
HepaRG细胞中抗病毒反应,而在
HepG2细胞中无此抗病毒反应。细胞基因表达分析发现
,干扰素和其他干扰素刺激基因在
HepG2和
HepaRG细胞中上调,而在重组杆状病毒转导的细胞中无此现象发生。有趣的是,一旦干扰素反应被中和抗体或
RNA干扰,则病毒复制立即恢复出现。总之,强的
HBV复制能够在
HepaRG转导细胞中引发
I型干扰素免疫反应,
从而
控制
HBV病毒复制
。 |